今日は休みだったので予備実験をちょっと10000、1000、100、10copyのRNAをPCRして検量線を書いてみた。結果Cq値は10000copyが26.43、1000copyが29.86、100copyが33.23、10copyが36.53、negativecontrolは50cycle回してもシグナルは全く出ない。この機会と試薬を使った時、Cq値からコピー数の目安が出る
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返信先: さん
検量線を描くとバッチリ直線に乗る。10ヶ月ほど使いっぱなしのリアルタイムPCRだけど定量性はきちんと出るので問題が無い。多分1copyのRNAも検出できる。この機械と使っている試薬で出たCq値はコピー数に換算すると何コピーかがこれでわかる。Cq値は使っている機器ごと違うのでこのチェックは必ず行う
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50cycl回してもネガコンからは一ミリもシグナル出てこないから「日本は回しすぎてCt値ガー！」って言うのは完全にガセだとわかる。自分でやってみれば一発でアレが嘘だとわかるよ。残念ながらあの説を唱える人達に自分でqPCRをやる能力のある人間はいない。それが答え
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固定ツイートにしてみたけど何を増やしたのか書き忘れてた…感染研のN2のプライマーとプローブを使って新型コロナウイルスのRNAを増やしています。
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